Содержание:
Лазерная микроскопия — это класс методов получения микроскопических изображений. В большинстве случаев используется лазерное сканирование некоторого образца дифракционно-ограниченным лазерным лучом. Сканирование может быть достигнуто путем перемещения либо лазерного луча, либо образца. Свет, несущий информацию о образце, может генерироваться различными способами, например, рассеянием, изменением поляризации, генерацией второй гармоники или возбуждением флуоресценции (→ флуоресцентная микроскопия). Интенсивность света, исходящего от объекта, регистрируется для каждой точки образца . Из этих данных изображения могут быть получены на компьютере, и, конечно, они могут быть сохранены в электронном виде. Численные методы могут быть применены для обработки изображений, например, для повышения контраста.
Конфокальный микроскоп
Часто используемый метод визуализации основан на конфокальной геометрии (→ конфокальные сканирующие микроскопы), где свет из фокуса в образце изображается (например, с помощью объектива микроскопа) на точечное отверстие, за которым обнаруживается оптическая сила. Эта геометрия подавляет влияние света, приходящего из других областей образца, например, до или после фокуса, поскольку такой свет не может эффективно проходить через отверстие. В действительности, в основном улучшается разрешение по глубине. Конфокальный принцип подчеркивается в термине конфокальная лазерная сканирующая микроскопия и более подробно обсуждается в статье о конфокальных сканирующих микроскопах.
Вместо флуоресценции можно использовать акустические эффекты импульсных лазерных лучей; полученный метод называется оптоакустической или фотоакустической микроскопией.
купить микроскоп для исследовательских центров или различных отраслей промышленности на https://nanophoton.ru/
Методы субдифракционного разрешения
Для большинства вариантов лазерной микроскопии дифракция ограничивает возможный радиус талии пучка сканирующего лазерного луча и, следовательно, полученное разрешение изображения. Однако некоторые методы позволяют преодолеть дифракционный предел и иногда называются микроскопией сверхразрешения или наноскопией. Один класс методов основан на неравномерном освещении в сочетании с нелинейным фотоответчиком. Стимулированная эмиссионная обеднительная микроскопия (STED-микроскопия) (описанная в статье о флуоресцентной микроскопии и связанная с Нобелевской премией по химии 2014 года) является наиболее популярным методом такого типа. Другие методы основаны на определенных флуоресцентных молекулах, которые предпочтительно занимают определенные части образца и могут быть локализованы очень точно.